環(huán)肽藥物作為醫(yī)藥領(lǐng)域的一顆冉冉升起的新星，其獨(dú)特的結(jié)構(gòu)和卓越的功能引起了全球科研人員的廣泛關(guān)注。這些環(huán)狀分子以其高穩(wěn)定性和選擇性，為治療多種疾病提供了新的治療策略。在環(huán)肽藥物的研究中，基因編碼展示技術(shù)和mRNA display技術(shù)發(fā)揮了重要作用。

mRNA display技術(shù)的應(yīng)用范圍廣泛，不僅包括多肽和蛋白質(zhì)適體的發(fā)現(xiàn)，還涵蓋了蛋白質(zhì)相互作用機(jī)制的深入闡明和分析，為環(huán)肽藥物的研究提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持。

美迪西云講堂邀請(qǐng)生物部高級(jí)研究員/項(xiàng)目經(jīng)理劉超博士為您解答環(huán)肽藥物研發(fā)中常見的問題，一起看看吧！

點(diǎn)擊鏈接：http://m.ccttf.com/video/cyclic-peptide.shtml，觀看劉超博士云講堂內(nèi)容！

1 篩選獲得的大環(huán)肽有重復(fù)的序列嗎？

劉超博士：確實(shí)存在這樣的情況。在我們的測(cè)序分析中，我們發(fā)現(xiàn)了一些重復(fù)的序列。有時(shí)，這些重復(fù)可能意味著某個(gè)序列被多次篩選出來(lái)，導(dǎo)致拷貝數(shù)增加?？赡苡腥齻€(gè)或四個(gè)序列指向同一個(gè)大環(huán)肽。對(duì)于這些具有相同序列的情況，我們將在后續(xù)的SPR驗(yàn)證或合成過(guò)程中給予重點(diǎn)關(guān)注。

2 如果可以提供靶點(diǎn)蛋白，我必須攜帶列出來(lái)的GST或者Fc標(biāo)簽嗎？是否能換成其他的純化標(biāo)簽嗎？

劉超博士：可以通過(guò)下圖看到文庫(kù)的基本信息，環(huán)肽本身帶有His標(biāo)簽的，標(biāo)簽是為了輔助環(huán)肽的提純過(guò)程，除了His標(biāo)簽之外，其他各種標(biāo)簽也可用于靶點(diǎn)蛋白的純化。這些靶點(diǎn)蛋白上的標(biāo)簽的關(guān)鍵作用是固定靶點(diǎn)蛋白，確保其在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的穩(wěn)定地固定在beads上。

3 想問一下mRNA的環(huán)肽展示技術(shù)可以和生物合成相結(jié)合?利用植物中的環(huán)化酶去環(huán)化？

劉超博士：可以的，環(huán)化酶是通過(guò)兩個(gè)環(huán)肽，類似直播中提到的半胱氨酸成環(huán)的。在我們實(shí)驗(yàn)室，環(huán)化是通過(guò)化學(xué)方法進(jìn)行的，確保了環(huán)肽的完整性和功能性。環(huán)化完成后，我們會(huì)進(jìn)行純化步驟，以確保獲得的環(huán)肽是完整且可以順利結(jié)合的。這一純化過(guò)程對(duì)于保證環(huán)肽的質(zhì)量和活性至關(guān)重要，確保了我們能夠提供高質(zhì)量的環(huán)肽產(chǎn)品。

4 你們?nèi)绾芜M(jìn)行QC檢測(cè)的？

劉超博士：我們采用的是高通量測(cè)序技術(shù)，目前還在開發(fā)LC-MS的方法。在實(shí)驗(yàn)的早期階段，我們通過(guò)銀染技術(shù)進(jìn)行定性分析，以確保翻譯過(guò)程中多肽的生成和翻譯的順利進(jìn)行。在mRNA/cDNA與大環(huán)肽共軛物階段，我們利用二代高通量測(cè)序技術(shù)，這有助于在篩選前確保文庫(kù)的質(zhì)量，并提供更準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù)。

5 請(qǐng)問通常mRNA篩選一輪需要多久？

劉超博士：從DNA文庫(kù)到完成篩選和測(cè)序的整個(gè)流程，我們預(yù)計(jì)需要大約5至6周的時(shí)間。這個(gè)時(shí)間框架主要是由于文庫(kù)測(cè)序階段相對(duì)較長(zhǎng)，大約需要兩周左右。實(shí)際上，如果只考慮操作過(guò)程，完整的操作可以在兩周內(nèi)完成。

如果您對(duì)于新藥研發(fā)臨床前研究過(guò)程中有一些困惑或者想要深入了解的專題內(nèi)容，可以留下您的問題和建議，美迪西希望和您一起，探索新藥研發(fā)的奇妙世界。

在線留言