- 流式細(xì)胞術(shù) (Flow Cytometry) 是一種用于計(jì)數(shù)和檢查懸浮在流體中的微觀顆粒的技術(shù)。它允許同時(shí)對(duì)流經(jīng)光學(xué)和/或電子檢測(cè)設(shè)備的單個(gè)細(xì)胞的物理和/或化學(xué)特性進(jìn)行多參數(shù)分析。流式細(xì)胞術(shù)可以高速、準(zhǔn)確、客觀檢測(cè)單個(gè)微粒的多參數(shù)的現(xiàn)代細(xì)胞分析技術(shù),目前,在藥物開(kāi)發(fā)的早期階段,尤其是抗腫瘤藥物,通過(guò)流式多色檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行復(fù)雜的細(xì)胞分析,能夠?yàn)榭蒲泄ぷ髡咻^大限度地提供有效數(shù)據(jù)。
- 截至目前,美迪西承接的流式檢測(cè)項(xiàng)目已經(jīng)近400項(xiàng),包括:細(xì)胞表面抗原表達(dá)的流式檢測(cè);細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡等的流式分析;動(dòng)物外周血及各免疫器官檢測(cè);移植瘤模型流式檢測(cè)等。美迪西流式檢測(cè)團(tuán)隊(duì)將每一個(gè)案例的特點(diǎn)與多年實(shí)戰(zhàn)經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)積累相結(jié)合,謹(jǐn)慎地將優(yōu)質(zhì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果提交到客戶(hù)手上,持續(xù)助力客戶(hù)的研發(fā)項(xiàng)目獲批。
流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用
- 流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用于藥物發(fā)現(xiàn):在治療靶點(diǎn)和聯(lián)合用藥的創(chuàng)新研究中,可以幫助研究者在藥物開(kāi)發(fā)的前期工作中展示不同個(gè)體之間的生物學(xué)效應(yīng)的差異,以進(jìn)一步闡明有效性的作用機(jī)理;幫助研究人員對(duì)腫瘤的“微環(huán)境”、外周血和其他宿主組織中的免疫系統(tǒng)進(jìn)行高通量和穩(wěn)健的定量分析,實(shí)現(xiàn)更清楚地預(yù)測(cè)免疫治療療效的目的,助力免疫治療方法的大規(guī)模發(fā)展。流式細(xì)胞術(shù)已用于藥物發(fā)現(xiàn)過(guò)程的每個(gè)階段,從靶點(diǎn)鑒定到先導(dǎo)化合物,大分子藥物,ADC 和疫苗開(kāi)發(fā)。細(xì)胞中的有效藥物靶標(biāo)幾乎涵蓋了所有可用的生物分子結(jié)構(gòu):細(xì)胞膜,參與機(jī)械功能或信號(hào)傳導(dǎo)的任何蛋白質(zhì),低至基因水平 DNA 及其他較小的分子如 RNA 等。
- 以高通量方式表征大型和多樣化的細(xì)胞群在初始靶標(biāo)鑒定中很有用。該過(guò)程可以通過(guò)用熒光探針標(biāo)記與疾病有關(guān)的細(xì)胞內(nèi)外的分子特征來(lái)進(jìn)一步優(yōu)化,且通過(guò)這種方式,可以快速評(píng)估細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和蛋白特征,例如特定蛋白質(zhì)的豐度或細(xì)胞膜的完整性。在靶蛋白鑒定和先導(dǎo)化合物產(chǎn)生之后,可以通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)研究藥物的功效和毒性。
- 流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用于免疫學(xué)檢測(cè)流式細(xì)胞術(shù)通常與使用單克隆抗體來(lái)識(shí)別免疫活性細(xì)胞、量化表面決定簇表達(dá)的變化以及在測(cè)試其功能特征之前分離細(xì)胞群亞群有關(guān)。多雙激光系統(tǒng)、多色熒光的發(fā)展以及用于多參數(shù)分析的計(jì)算系統(tǒng)的改進(jìn)有助于改進(jìn)診斷、預(yù)后和監(jiān)測(cè)治療。流式細(xì)胞術(shù)的進(jìn)步現(xiàn)在允許在一天內(nèi)對(duì)數(shù)百個(gè)樣本進(jìn)行自動(dòng)化、多參數(shù)分析。隨著計(jì)算機(jī)速度和存儲(chǔ)能力的提高,流式細(xì)胞術(shù)可以促進(jìn)免疫學(xué)研究領(lǐng)域。
- 流式細(xì)胞術(shù)在藥物研發(fā)中的優(yōu)勢(shì)在治療靶點(diǎn)和聯(lián)合用藥的創(chuàng)新研究中,可以幫助研究者在藥物開(kāi)發(fā)的前期工作中展示不同個(gè)體之間的生物學(xué)效應(yīng)的差異,以進(jìn)一步闡明有效性的作用機(jī)理;幫助研究人員對(duì)腫瘤微環(huán)境、外周血和其他宿主組織中的免疫系統(tǒng)進(jìn)行高通量和穩(wěn)健的定量分析,實(shí)現(xiàn)更清楚地預(yù)測(cè)免疫治療療效的目的,助力免疫治療方法的大規(guī)模發(fā)展。
美迪西流式技術(shù)平臺(tái)服務(wù)介紹
- 美迪西流式技術(shù)平臺(tái)致力于探索和洞見(jiàn)腫瘤免疫靶向治療藥物的進(jìn)展,于早期研發(fā)階段提供準(zhǔn)確的可依靠的試驗(yàn)預(yù)測(cè)數(shù)據(jù)。我們的團(tuán)隊(duì)具有豐富的實(shí)驗(yàn)操作、流式方法開(kāi)發(fā)和數(shù)據(jù)分析經(jīng)驗(yàn),人均可獨(dú)立負(fù)責(zé)項(xiàng)目。平臺(tái)配備有 4 臺(tái) BD 品牌的強(qiáng)大流式細(xì)胞檢測(cè)儀,新引進(jìn)的高參數(shù)的 BD FACSymphony A5 流式細(xì)胞分析儀,配置五激光 31 參數(shù),可同時(shí)啟用多達(dá) 29 種顏色,能夠滿足客戶(hù)科研和分析需要。平臺(tái)建立至今已積累了眾多國(guó)內(nèi)外知名醫(yī)藥企業(yè)及科研機(jī)構(gòu)客戶(hù),包括日本武田制藥、上海恒瑞醫(yī)藥、廣州百奧泰以及三生國(guó)建等,并達(dá)成多年的持續(xù)合作,獲得客戶(hù)持續(xù)的信任和好評(píng)。相關(guān)推薦:
美迪西流式細(xì)胞分選服務(wù)平臺(tái) - 方法開(kāi)發(fā)和樣品檢測(cè)美迪西流式平臺(tái)有小鼠、大鼠、犬、猴、人等種屬以及免疫缺陷、轉(zhuǎn)基因、人源化等動(dòng)物模型的流式檢測(cè)方法開(kāi)發(fā)和樣本檢測(cè)經(jīng)驗(yàn),擁有外周血、脾臟、淋巴節(jié)、骨髓、腫瘤、肝臟、肺臟等多種樣本處理經(jīng)驗(yàn)。
- 建立了從基礎(chǔ)分析方案(T、B、NK細(xì)胞)到復(fù)雜的檢測(cè)分析方案(調(diào)節(jié)性T細(xì)胞、髓系細(xì)胞分析、干細(xì)胞分化等),涉及細(xì)胞表面蛋白、胞內(nèi)/核內(nèi)蛋白(轉(zhuǎn)錄因子/趨化因子/細(xì)胞因子等)檢測(cè),可以滿足客戶(hù)檢測(cè)分析需求。
- 美迪西流式平臺(tái)提供采用 ELISA、Luminex、MSD、EliSpot、FluoroSpot、流式CBA、Bio-Plex 200懸浮芯片技術(shù)等進(jìn)行高參數(shù)的細(xì)胞因子檢測(cè)服務(wù),每次檢測(cè)僅需微量樣本,檢測(cè)特異性強(qiáng),穩(wěn)定性好,可重復(fù)性高。
- 抗體藥物受體占有率(RO)項(xiàng)目2017年至今,已完成臨床/臨床前RO檢測(cè)多項(xiàng),涉及PD-1,CD20,CD47和TIGIT等多種不同靶點(diǎn)的檢測(cè)。
- 新型免疫細(xì)胞制品藥物的生物分析包括干細(xì)胞、CAR-T細(xì)胞以及CAR-NK細(xì)胞等細(xì)胞治療產(chǎn)品及基因療法藥物的生物分析。
Assay Cell Medicilon capability
(Human,Mouse,Rat,Monkey,Dog)FACS T cell /Treg Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey,Dog) B cell Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey,Dog) NK cell Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey) Macrophage,Monocyte,Neutrophil Yes (Human,Mouse,Monkey) DC cell Yes (Human,Mouse,Monkey) MDSC Yes (Human,Mouse,Monkey) Checkpoint Yes (Human,Mouse) Receptor Occupancy Yes (Human,Mouse,Monkey) Cytokine Phosphorylation Yes (Human,Mouse) Elisa Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey) CBA Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey) Luminex Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey) MSD Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey) ELISpot , FluoroSpot Yes (Human,Mouse,Monkey) Cell differentiation
polarizationT/M1/M2 macrophage Yes (Human) Cell cytotoxicity ADCC, ADCP Yes (Human) 持續(xù)更新中食蟹猴細(xì)胞亞群流式檢測(cè)實(shí)例小鼠NK、T細(xì)胞亞群流式檢測(cè)實(shí)例 - 美迪西FACS檢測(cè)儀器設(shè)備BD Symphony A3/Fortessa/Celesta 可以檢測(cè)不同的血液和組織樣本
擁有5激光,28通道配置;
利用全反射的光路結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì),避免透射過(guò)程對(duì)光信號(hào)的損耗,提高分析的靈敏度,能夠識(shí)別和分析罕見(jiàn)的細(xì)胞類(lèi)型和情況;
先進(jìn)的流式產(chǎn)品,可實(shí)現(xiàn)對(duì)免疫系統(tǒng)大數(shù)據(jù)的獲取和分析,為探索未知的免疫組學(xué)提供了廣闊平臺(tái)。
- 美迪西案例: FACS 檢測(cè)在 FCM 處理和檢測(cè)后,可以使用 FLOWJO 對(duì)血液/淋巴結(jié)/脾臟/骨髓/腫瘤等樣本進(jìn)行分析。目前已有 50 多個(gè)經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的 Panels。Data shown was Mouse Treg&Teff Panel_mouse_Tumor在 FCM 處理和檢測(cè)后,可以使用 FLOWJO 對(duì)血液/淋巴結(jié)/脾臟/骨髓/腫瘤等樣本進(jìn)行分析。目前已有 50 多個(gè)經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的 PanelsData shown was Cyno T/B/NK Panel_monkey_Blood血樣經(jīng)過(guò) FCM 處理和檢測(cè)后,可以使用 Flowjo 進(jìn)行受體占位分析。Data shown was Receptor Occupancy_Cynomolgus monkey_Blood
- 美迪西多因子檢測(cè)服務(wù)儀器設(shè)備通過(guò) Covaris E220R/BIO-RAD Bio-Plex 200/MD SPECTRAMAX M2/MSD 處理細(xì)胞因子后,可以分析不同的血清/血漿和組織樣本,可檢測(cè)多達(dá) 40 多個(gè)因子。Covaris E220 系列超聲破碎儀可以非常快速和完全地進(jìn)行均質(zhì)化、樣品分散和樣品抽提。樣本回收效率高,重復(fù)性好,整個(gè)處理過(guò)程恒溫,非接觸。Bio-Plex 200 系統(tǒng)采用流式細(xì)胞技術(shù)對(duì)染色的微球在液流路中逐個(gè)循序通過(guò)。相較于傳統(tǒng)的 ELISA 檢測(cè)方案,在樣本使用量和檢測(cè)通量方面優(yōu)勢(shì)明顯,大大節(jié)省了人力和物力成本。
- 美迪西案例: Cytokine 檢測(cè)細(xì)胞上清/血清/血漿/肝臟/肺臟/腫瘤等樣本經(jīng)過(guò)體內(nèi)或體外給藥刺激后可進(jìn)行檢測(cè)分析。Data shown was CBA_Cynomolgus monkey_PlamsaPBMC/MNC/脾臟等樣本經(jīng)體內(nèi)或體外給藥刺激后,可通過(guò) CTL 熒光酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)分析儀 (CTL-ImmunoSpot S6) 檢測(cè)分析。Data shown was EliSpot/FluoroSpot_PBMC
- 細(xì)胞功能檢測(cè)與流式細(xì)胞儀,酶標(biāo)儀或熒光顯微鏡配合使用檢測(cè)細(xì)胞分化/溶解/吞噬/殺傷活性,適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞系。
- 美迪西案例: 細(xì)胞功能檢測(cè)腫瘤細(xì)胞經(jīng) Daratumumab 或 Rituximab 體外孵育后,更容易被巨噬細(xì)胞吞噬。樣本經(jīng)由 FCM 處理和檢測(cè)后,可用 Flowjo 對(duì)細(xì)胞系/血液/組織樣本分析。Data shown was ADCP_PBMC
總結(jié)與展望
- 自腫瘤,自身免疫病及呼吸道疾病等發(fā)展日益復(fù)雜以來(lái),流式細(xì)胞術(shù)已成為功能和安全性評(píng)價(jià)中重要的分析手段。借助新一代的高速單光子傳感器,流式細(xì)胞術(shù)將可能發(fā)展成為較靈敏的熒光檢測(cè)系統(tǒng),從而帶來(lái)新的可能性,例如進(jìn)行l(wèi)ifetime fluorescence analysis,可以觀察到蛋白構(gòu)象變化。隨著高度冷卻、低噪聲的單光子傳感器技術(shù)完全數(shù)字化,將使絕對(duì)定量成為可能,將測(cè)量實(shí)際光子數(shù),而不是現(xiàn)在流式中常用的arbitrary units,使得世界各地的儀器之間絕對(duì)定量結(jié)果可以進(jìn)行直接比較,將對(duì)臨床流式和藥理學(xué)產(chǎn)生巨大影響。流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用的最終目標(biāo)是在單細(xì)胞水平上發(fā)現(xiàn)細(xì)胞受體和功能之間直接和決定性關(guān)系。今天的大多數(shù)流式細(xì)胞儀都集中在免疫表型上,但免疫分型絕不是流式細(xì)胞術(shù)的唯一機(jī)會(huì),如果將流式細(xì)胞術(shù)中無(wú)法常規(guī)檢測(cè)的指標(biāo)與細(xì)胞周期、代謝和結(jié)構(gòu)組分等相結(jié)合起來(lái),未來(lái)的應(yīng)用場(chǎng)景幾乎是無(wú)限的。