脂質(zhì)體，作為一種由磷脂雙分子層構(gòu)成的微型泡囊，自上世紀(jì)60年代被提出以來，便因其獨(dú)特的藥物遞送特性而備受關(guān)注。脂質(zhì)體藥物憑借其獨(dú)特的優(yōu)勢，如提高藥物溶解度、改善藥物穩(wěn)定性、增強(qiáng)藥物靶向性等，在醫(yī)藥領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大的發(fā)展?jié)摿Α?/div>

配備了先進(jìn)的 Thermo U3000-CAD檢測系統(tǒng)，靈敏度高。

案例：脂質(zhì)體化合物（Lipids）的制備案例

脂質(zhì)體化合物，無紫外，疏水性比較強(qiáng)，采用Waters 2545-Qda//UV/ELSD制備液相系統(tǒng)進(jìn)行制備，結(jié)合質(zhì)譜信息，使用DAD/ELSD引導(dǎo)收集, 分離后純度可達(dá)98%以上。

美迪西可根據(jù)以下制備方法，提供脂質(zhì)體納米微粒制備服務(wù)。

溶劑注入法是一種比較簡單制備脂質(zhì)體的方法，將脂質(zhì)成分溶解在有機(jī)溶劑中，然后將所需的藥物以一定速率注射到有機(jī)相中以誘導(dǎo)脂質(zhì)體的形成。

https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2022.e09394

薄膜分散法簡單易操作，將藥物和脂質(zhì)溶于有機(jī)溶劑后，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓除去溶劑，使脂質(zhì)在容器壁上形成薄膜，再加入合適的水性介質(zhì)，使脂質(zhì)薄膜水化脫落即可制備載藥脂質(zhì)體。

https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2022.e09394

一般是將膜材的有機(jī)溶液與藥物水溶液超聲形成W/O型乳液，再減壓蒸發(fā)，就可得到脂質(zhì)體。此法適用于水溶性藥物和大分子活性物質(zhì)。

擠出法即脂質(zhì)體通過外力的作用，擠壓通過孔徑小于自身粒徑的濾膜時，由于剪切力的作用導(dǎo)致其發(fā)生形變，從而產(chǎn)生破裂，隨后破裂的雙層立即重新結(jié)合，形成更小的脂質(zhì)體。

微流控制備脂質(zhì)體是一種高效快速的方法，該技術(shù)通過精確控制微流體在微通道中的流動和混合，實(shí)現(xiàn)了脂質(zhì)體的高精度、高均一性的制備。

美迪西擁有的設(shè)備體系能夠全面覆蓋脂質(zhì)體藥物的研發(fā)流程，從處方篩選到制備工藝優(yōu)化，再到詳盡的性能分析與質(zhì)量控制，盡可能滿足客戶需求。

美迪西可提供以下專業(yè)服務(wù)：

(1) 鑒別、含量測定和脂質(zhì)相關(guān)降解產(chǎn)物檢查
(2) 粒徑及其分布、包封率、表面電荷、體外藥物釋放和藥物泄漏；結(jié)構(gòu)和形態(tài)、脂膜的熱力學(xué)性質(zhì)、包封體積、包封藥物的狀態(tài)
(3) 其他：pH值、脂質(zhì)體藥物的藥脂比、粘度、無菌、熱原/細(xì)菌內(nèi)毒素

(1) 性狀
(2) 鑒別（API、結(jié)構(gòu)或功能性成分（包括脂質(zhì)和非脂質(zhì)））
(3) 檢查（pH、滲透壓摩爾濃度、表面電荷、粒徑及其分布、濁度、包封率、體外釋放率、有關(guān)物質(zhì)、脂質(zhì)相關(guān)降解產(chǎn)物、裝量、殘留溶劑、可見異物、不溶性微粒、無菌、細(xì)菌內(nèi)毒素）
(4) 含量（API、結(jié)構(gòu)或功能性成分（包括脂質(zhì)和非脂質(zhì)））

(1) 性狀
(2) 檢查（pH、滲透壓摩爾濃度、表面電荷、粒徑及其分布、濁度、包封率、體外釋放率、有關(guān)物質(zhì)、脂質(zhì)相關(guān)降解產(chǎn)物、可見異物、不溶性微粒、無菌、細(xì)菌內(nèi)毒素）
含量（API、結(jié)構(gòu)或功能性成分（包括脂質(zhì)和非脂質(zhì)））

案例：腦靶向脂質(zhì)體研發(fā)

美迪西與美國南加州大學(xué)（University of Southern California）攜手，開發(fā)一種腦靶向脂質(zhì)體藥物遞送系統(tǒng)。這一合作項(xiàng)目將美迪西在藥物制劑研發(fā)領(lǐng)域的深厚積累與南加州大學(xué)在神經(jīng)科學(xué)方面的卓越研究能力進(jìn)行結(jié)合，共同致力于解決藥物遞送領(lǐng)域的一大難題——如何有效跨越血腦屏障（Blood-Brain Barrier, BBB），以實(shí)現(xiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病（如阿爾茨海默病、帕金森病、腦腫瘤等）的精準(zhǔn)治療。

脂質(zhì)體包載藥物（左）及對照（右）

納米藥物在體內(nèi)可能通過被動靶向、主動靶向、物理靶向、化學(xué)靶向等方式高選擇性地分于特定的器官、組織、細(xì)胞、細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)，改變原形藥物的藥代動力學(xué)特征如體內(nèi)組織分布，并進(jìn)而影響其安全性和有效性。

可先開展體外試驗(yàn)進(jìn)行早期篩選和安全性風(fēng)險預(yù)評估如細(xì)胞攝取及相互作用、補(bǔ)體激活情況等研究。應(yīng)選擇對毒性敏感的種屬。

可先開展體外試驗(yàn)進(jìn)行早期篩選和安全性風(fēng)險預(yù)評估如細(xì)胞攝取及相互作用、補(bǔ)體激活情況等研究。應(yīng)選擇對毒性敏感的種屬。應(yīng)提供生產(chǎn)過程、關(guān)鍵質(zhì)量特征、制劑等方面的信息，如穩(wěn)定性（藥物和載體的化學(xué)穩(wěn)定性、物理穩(wěn)定性）、分散劑 /分散方法、納米特性（粒徑、粒徑分布、比表面積、表面電荷、表面配體等）、表面性質(zhì)（包衣及厚度、配體及密度等）、載藥量、濃度、溶解性、藥物從載體的釋放、納米藥物的聚集狀態(tài)及變化過程、表征的方法和檢測標(biāo)準(zhǔn)等。若納米藥物需稀釋和/或配制后給藥，應(yīng)關(guān)注納米藥物配制后在不同濃度、溶媒、體外細(xì)胞培養(yǎng)液或者其它體外試驗(yàn)體系下的穩(wěn)定性、均一性和藥物釋放率等特征是否發(fā)生改變。

給藥劑量：除采用傳統(tǒng)的質(zhì)量濃度外可考慮同時提供質(zhì)量濃度和納米顆粒數(shù)目/比表面積的劑量單位信息。
對照組：包含新藥物活性成分的，設(shè)單獨(dú)的藥物活性成分組;包含新納米載體的，設(shè)無藥納米載體組。
檢測時間和頻率：可能在組織中清除慢，根據(jù)蓄積情況設(shè)置檢測時間點(diǎn)和檢測頻率，必要時延長恢復(fù)期。

免疫原性和免疫毒性：納米藥物主要經(jīng)單核吞細(xì)胞系統(tǒng)的吞細(xì)胞潔除，聚集到肝臟、脾臟和淋巴組織等器官組織 。可能吸附不同生物分子(以蛋白質(zhì)分子為主)形成生物分子層(如蛋白冠)，進(jìn)而被免疫細(xì)胞表面受體識別，產(chǎn)生免疫原性和免疫毒性，還可導(dǎo)致類過敏反應(yīng)?？赡艽嬖诿庖咴鰪?qiáng)、免疫抑制、補(bǔ)體活化、炎反應(yīng)、過敏反應(yīng)、細(xì)胞因子釋放等風(fēng)險。參考ICH S8。
神經(jīng)系統(tǒng)毒性：納米藥物與普通藥物相比更容易透過血腦屏障，有神經(jīng)毒性風(fēng)險的藥物應(yīng)進(jìn)行安全藥理試驗(yàn)評估對神經(jīng)系統(tǒng)的影響。
遺傳毒性：新藥物活性成分的納米藥物和新納米載體/輔料需要開展遺傳毒性評價。
生殖毒性：納米藥物可能容易通過胎盤屏障、血睪屏障、血乳屏障等生物屏障，因此應(yīng)關(guān)注生殖毒性風(fēng)險，參考ICH S5。
致癌性：參考ICH S1(長期使用的需進(jìn)行)。
制劑安全性：同注射劑要求，體外溶血試驗(yàn)應(yīng)注意，若納米藥物在溶液中會發(fā)生團(tuán)聚，建議進(jìn)行體內(nèi)溶血試驗(yàn)。
毒代動力學(xué)：部分納米藥物可能在組織中存留的時間較長，組織暴露量高于系統(tǒng)暴露量，在體內(nèi)某些組織器官發(fā)生蓄積，重復(fù)給藥后可能產(chǎn)生明顯的毒性反應(yīng)。

經(jīng)皮給藥：納米藥物可能具有較高的毛囊滲透性或分布至局部淋巴結(jié)。毒性試驗(yàn)中應(yīng)注意考察不同皮膚狀態(tài)(完整、破損、患病)、不同影響因素下(如光照)納米藥物在給藥局部和全身的暴露量差異以及相應(yīng)的毒性風(fēng)險。
皮下給藥：具有更高致敏潛力。需關(guān)注不溶性納米藥物在皮下的蓄積和轉(zhuǎn)移以及相應(yīng)的毒性風(fēng)險。
鼻腔給藥：相比胃粘膜更有利于藥物吸收，可能通過嗅神經(jīng)通路透過血腦屏障。
吸入給藥：納米藥物可廣泛分布于肺泡表面，應(yīng)關(guān)注局部/呼吸毒性。應(yīng)關(guān)注不溶性載體類納米藥物在肺部的蓄積和轉(zhuǎn)移。
靜脈給藥：與普通藥物不同的組織分布與半衰期。
口服給藥：不溶性納米成分可能蓄積在某些組織。

通過藥代動力學(xué)研究，美迪西能夠準(zhǔn)確評估脂質(zhì)體藥物在體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄過程，為藥物的優(yōu)化提供科學(xué)依據(jù)。

載體類納米藥物需要分別測定血液中游離藥物和負(fù)載型藥物(總藥物)的濃度。

某些載體類納米藥物(如PEG化的)靜脈注射后可誘導(dǎo)免疫反應(yīng)，重復(fù)給藥后會加速清除，并在肝脾等組織聚集量增加。即加速血液清除(Accelerated Blood Clearance,ABC)現(xiàn)象。此類載體類納米藥物在多次給藥試驗(yàn)時，建議考察是否存在ABC現(xiàn)象(如抗PEG抗體)。

因此，應(yīng)進(jìn)行不同組織中總藥物分布研究，如可行，建議對靶器官和潛在毒性器官中的游離型藥物和負(fù)載型藥物分別進(jìn)行測定。對于緩慢生物降解或具有明顯穿透生理屏障性質(zhì)的高分子載體材料，建議進(jìn)行不同組織中總載體材料的分布研究。同時，鼓勵在不同組織中進(jìn)行總粒子分布動力學(xué)和釋藥動力學(xué)研究。

載體類納米藥物中的活性藥物及其解聚的載體材料在體內(nèi)主要經(jīng)肝臟和其它組織中的代謝酶代謝。此外載藥粒子易被MPS吞噬，進(jìn)而被溶酶體降解或代謝，可能對藥物和載體材料代謝/降解產(chǎn)物的種類和數(shù)量產(chǎn)生影響。因此，應(yīng)確定活性藥物和載體材料的主要代謝/降解途徑，并對其代謝/降解產(chǎn)物進(jìn)行分析。

載體類納米藥物中的活性藥物和載體材料可能通過腎小球?yàn)V過和腎小管分泌進(jìn)入尿液而排泄，或通過肝臟以膽汁分泌形式隨糞便排泄。載藥粒子自身一般不易經(jīng)過上述途徑直接排泄，需解聚成載體材料或載體材料降解后主要經(jīng)腎臟排泄。因此，應(yīng)確定給藥后活性藥物的排泄途徑、排泄速率及物質(zhì)平衡。同時鑒于載體材料的特殊性，建議根據(jù)載體材料的具體情況對其開展排泄研究。

案例 脂質(zhì)體化合物（Lipids）的制備案例

大鼠TK：同劑量下，脂質(zhì)體組游離藥物與普通注射液血漿暴露量對比，Cmax降低，但AUC（0-144h）更高，脂質(zhì)體包裹的藥物具有一定緩釋作用。

荷瘤小鼠組織分布：同劑量下，脂質(zhì)體與普通注射液相比，藥物在腫瘤組織中的蓄積量更高，可以更好地發(fā)揮藥效。

平臺采用先進(jìn)的生物分析技術(shù)，對脂質(zhì)體藥物進(jìn)行精確的定量分析，為藥物研發(fā)提供有力支持。

服務(wù)內(nèi)容：開展藥代動力學(xué)（PK）和毒代動力學(xué)（TK）樣本生物分析工作；全方位支持從早期篩選到臨床前以及臨床各階段的生物分析。

(1) 脂質(zhì)體目標(biāo)分析物
指導(dǎo)原則指出進(jìn)行藥代動力學(xué)研究時需測定生物樣本中負(fù)載型（或總藥物）和游離型（完全游離+蛋白結(jié)合）藥物濃度

(2) 前處理技術(shù)
蛋白沉淀（PPT）：破壞蛋白質(zhì)分子的水化作用或者減弱分子間同性相斥作用的因子，使蛋白質(zhì)在水中的溶解度降低而沉降下來轉(zhuǎn)化為固體的分離方法。常用有機(jī)試劑沉淀、等電點(diǎn)沉淀、鹽析等。
液液萃取（LLE）：根據(jù)化合物極性不同，采用相似相容原理，將分析物或不需要的干擾成分從一個液相（如生物樣品）提取到另一個不混溶液相（如有機(jī)溶劑），從而進(jìn)行樣品清理。常用溶劑有正己烷、甲基叔丁基醚、正丁醇和乙酸乙酯等。
固相萃?。⊿PE）：機(jī)理類似于液相色譜，通過溶解在液體中的溶質(zhì)（分析物）與吸附劑材料（固定相）之間的親和力或相互作用實(shí)現(xiàn)。常用有反向SPE、離子交換SPE。
超濾：超濾是一種加壓膜分離技術(shù)，即在一定的壓力下，使小分子溶質(zhì)和溶劑穿過一定孔徑的特制的薄膜，而使大分子溶質(zhì)不能透過，留在膜的一邊，從而使大分子物質(zhì)得到了部分的純化。常用為超濾管。
此外還有平衡透析、超速離心、排阻色譜、柱切換色譜等分離方法。

固相萃?。⊿PE）
SPE 的大致流程：樣品準(zhǔn)備→活化→平衡→上樣→淋洗→洗脫

不同生物基質(zhì)測定
指導(dǎo)原則中建議對血漿和組織樣品中總藥物和游離藥物濃度進(jìn)行測定。但是目前組織還是采用物理勻漿處理的方式對樣品進(jìn)行處理，這勢必會造成脂質(zhì)體的破碎，所以，現(xiàn)階段技術(shù)手段還做不到組織中游離藥物濃度的檢測。

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