脂質(zhì)體類藥物，作為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的一大突破，不僅能顯著提升藥物的溶解度、穩(wěn)定性和生物利用度，還能大幅降低對(duì)健康組織的毒副作用。從腫瘤治療到疫苗輸送，再到基因治療，脂質(zhì)體類藥物的應(yīng)用前景可謂廣闊無垠。然而，這種創(chuàng)新療法的前沿載體也帶來了獨(dú)特的挑戰(zhàn)。脂質(zhì)體類藥物的生物分析是一個(gè)復(fù)雜而關(guān)鍵的過程，涉及結(jié)構(gòu)分析、穩(wěn)定性研究和藥代動(dòng)力學(xué)等多個(gè)層面。如何攻克這些難題？如何在實(shí)戰(zhàn)中應(yīng)對(duì)各種挑戰(zhàn)？

云講堂特邀脂質(zhì)體領(lǐng)域的資深科研老師——練賽，憑借豐富的經(jīng)驗(yàn)和獨(dú)到的見解為您深度解析脂質(zhì)體類藥物生物分析的實(shí)戰(zhàn)難題。

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1 怎么在方法開發(fā)階段選擇相應(yīng)的SPE板？

練賽：我們首先要判斷化合物的極性，對(duì)于弱酸、弱堿及中性化合物，建議選擇硅膠基質(zhì)的反向SPE板。適用于大多數(shù)小分子生物分析，比如Waters的HLB系列和Thermo Fisher的SOLA系列板。

對(duì)于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿化合物，則需要考慮離子交換的SPE板?？梢赃x擇Waters的四合一離子交換開發(fā)的板，如適用于堿性化合物的Oasis MCX陽離子交換板，適合酸性化合物的MAX陰離子交換板，適合強(qiáng)堿性或季銨類化合物的WCX弱陽離子交換板，以及適合強(qiáng)酸化合物的WAX弱陰離子交換板。

此外，選擇合適規(guī)格的板子也很重要，可以根據(jù)樣品的載量（如2毫克、10毫克或30毫克）進(jìn)行選擇。

2 為什么在SPE活化和平衡階段，使用葡萄糖注射液、血漿進(jìn)行活化和平衡操作。是基于什么樣的考慮？

練賽：在測定游離長春瑞濱的包封率時(shí)，我們發(fā)現(xiàn)測得的結(jié)果始終低于客戶提供的值。這可能表明中間處理過程存在脂質(zhì)體破碎或有蛋白質(zhì)結(jié)合部分未能完全被淋洗出去的情況。因此，我們首先考慮處理可能的脂質(zhì)體破碎問題，在上樣操作之前額外添加葡萄糖進(jìn)行預(yù)處理。

另一方面，如果固定相上硅膠基團(tuán)與蛋白結(jié)合的部分沒有完全洗脫，我們就考慮到用空白基質(zhì)，進(jìn)行預(yù)先占位，讓后續(xù)蛋白結(jié)合的部分沒有辦法結(jié)合再固定相上。

3 為什么總的藥物方法學(xué)驗(yàn)證和游離藥物方法學(xué)驗(yàn)證標(biāo)曲和質(zhì)控的配制有那么多不同？

練賽：我們所有的樣品都來自同一動(dòng)物體，無論是總藥物濃度還是游離藥物濃度的測定，都基于同一樣品。在測定總藥物濃度時(shí)，樣品中通常是存在脂質(zhì)體。如果脂質(zhì)體沒有完全破碎的情況下，那么測定出的總藥物濃度可能不準(zhǔn)確。為了模擬樣品中脂質(zhì)體的真實(shí)情況，我們使用含有脂質(zhì)體的質(zhì)控樣品來校正。只有當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的脂質(zhì)體能夠完全匹配時(shí)，才能準(zhǔn)確反映出總的藥物濃度是否完全破碎。

對(duì)于游離藥物的測定，我們通過減去含脂質(zhì)體的測定結(jié)果得出。然而，在最終的樣品中，游離藥物與脂質(zhì)體同時(shí)存在，因此我們需要考慮脂質(zhì)體的破碎和游離小分子的穩(wěn)定性。為了模擬真實(shí)樣品中的情況，我們需要引入同時(shí)含有脂質(zhì)體和游離小分子的質(zhì)控樣品進(jìn)行研究。

4 小鼠組織的檢測 也是測總藥和游離部分嗎？

練賽：根據(jù)脂質(zhì)體的指導(dǎo)原則，是建議說需要測總藥和游離的，但是組織需要?jiǎng)驖{處理，往往是做不了游離測定，所以目前還是檢測總藥。

5 請(qǐng)問膠束注射液藥物和脂質(zhì)體藥物一樣需要同時(shí)測定總藥和游離藥物嗎？可以同等方面去考慮嗎？有沒有什么不同呢？

練賽：膠束注射液和脂質(zhì)體注射液等納米藥物在體內(nèi)血漿藥物濃度測定方面，是需要同等考慮的，都需要測定游離和總藥物濃度。詳見納米藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則。目前美迪西兩個(gè)膠束注射液的項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)，在游離和總藥物濃度測定方法都是一樣的，不同的就是前處理的分離手段。

6 添加保護(hù)劑葡萄糖的濃度和比例是如何優(yōu)化并確定下來的?

練賽：通常選擇是5%的葡萄糖，比例是按1:10去添加。如果保護(hù)程度不夠，相應(yīng)濃度可以提高，但是添加比例一般不要小于1:10。

無論您是制藥行業(yè)的資深專家，還是對(duì)前沿醫(yī)學(xué)技術(shù)充滿好奇的新晉學(xué)習(xí)者，美迪西云講堂都將為您敞開一扇通往藥物研發(fā)未來的大門。如果您有想要了解的熱門主題或者對(duì)臨床前研究的服務(wù)感興趣想在云講堂聽到詳細(xì)的介紹，歡迎留言或者提問，我們希望能夠和您一起多聊聊。