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Drug discovery
藥物發(fā)現(xiàn)

E.Coli蛋白表達(dá)系統(tǒng)

原核表達(dá)系統(tǒng)(大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng))是基因表達(dá)技術(shù)中發(fā)展較早,應(yīng)用較廣泛的經(jīng)典表達(dá)系統(tǒng),近幾十年,大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)也不斷得到發(fā)展和完善,被科研及工業(yè)用戶大量用于各種重組蛋白表達(dá)。與其它表達(dá)系統(tǒng)相比,具有目的基因表達(dá)水平高,培養(yǎng)周期短,抗污染能力強(qiáng),成本相對低等特點。
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服務(wù)項目
美迪西科研人員建立了成熟的大腸桿菌表達(dá)及純化服務(wù)平臺,提供包括各種重組蛋白以及其復(fù)合物在大腸桿菌中的表達(dá)與純化服務(wù)。


  • 原核表達(dá)系統(tǒng)(大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng))服務(wù)項目:
    重組質(zhì)粒構(gòu)建;重組表達(dá)測試;可溶性表達(dá)條件測試;小規(guī)模蛋白表達(dá)和純化(2L培養(yǎng)基培養(yǎng)產(chǎn)物);大規(guī)模蛋白表達(dá)和純化(10L以上)。
項目步驟
步驟實驗內(nèi)容實驗時間備注
1重組質(zhì)粒構(gòu)建2 周可選擇不同載體,不同標(biāo)簽His, Trx , GST, SUMO…
2重組表達(dá)測試1周不同表達(dá)菌株可選
3可溶性表達(dá)測試1-2周不同誘導(dǎo)劑,誘導(dǎo)溫度,也可重新考慮基于蛋白質(zhì)
結(jié)構(gòu)點突變或者缺失突變的突變體構(gòu)建
4小規(guī)模蛋白表達(dá)和純化1-2周若為包涵體表達(dá),時間和方法將有所調(diào)整
5大規(guī)模蛋白表達(dá)和純化根據(jù)表達(dá)體積商定可選擇搖瓶或者發(fā)酵罐培養(yǎng)
備注
Remarks

您可根據(jù)實驗需求選擇上述任一實驗內(nèi)容,或相關(guān)實驗內(nèi)容的組合;

純化時選用親和純化、離子柱純化、疏水填料純化和分子篩純化; 蛋白本身特性,表達(dá)系統(tǒng)的選擇會影響最終蛋白的純度和活性。

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